

詳細介紹
蔡司Lattice Lightsheet 7
活細胞的長時間體積成像
蔡司Lattice Lightsheet 7使光片熒光顯微技術可用于亞細胞分辨率下的活細胞成像,同時還可使用標準樣品載具。借助該自動化且易用的系統,可以實現在數小時到數天內對亞細胞結構的動態變化進行體積成像,并在整個過程中提供出色的保護,避免光毒性對樣品的影響。該系統能夠以豐富細節探索生命動態變化的過程——輕而易舉,超乎想象!
☆可直接在標準樣品載具上檢查活體樣品
☆可在長達數小時、甚至數天內觀察亞細胞層面的生命動態
☆以真實比例顯示三維細節
☆不錯過蓋玻片樣品動態變化的任何細節
☆可以把全部注意力放在您的實驗上



晶格光片顯微技術的原理

Conventional (Gaussian) light sheet microscopy splits fluorescence excitation and detection into two separate light paths, allowing to generate an inherent optical section by exciting only fluorescence from the in-focus plane.
通常(也稱為高斯光片顯微技術)以其低光毒性成像條件和出色的成像速度而聞名。突破性的激發和檢測去耦化概念可以僅對檢測物鏡焦平面內的樣品進行照明。根據樣品移動片層并在每個焦平面上記錄一張圖像,即可在不暴露非焦平面樣品的情況下獲得體積數據。

Lattice light sheet microscopy overcomes the limitations of Gaussian beams (limited optical sectioning, limited field of view) and Bessel beams (strong rings, excitation of out-of-focus fluorescence) by generating long and thin light sheets to achieve subcellular resolution.
將光片顯微技術與共聚焦范圍內近各向同性分辨率的優點集于一身。優良的光束塑造技術創造了晶格狀光片,此光片比標準高斯光片要薄得多,在相似的成像速度下可獲得更高的分辨率。我們使用空間光調制器(SLM)創建光片的晶格結構,然后通過掃描裝置投射到樣品上。掃描裝置對晶格結構進行抖動處理后,即可創建一個平滑的光片。
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帶有激發物鏡(1)、彎月透鏡(2)和含自由波前光學元件的檢測物鏡(3)的樣品載具和核心光學模塊示意圖。示例顯示了不帶(A)和帶有折射率校正(B)的成像。
蔡司實現晶格光片顯微技術
在開發Lattice Lightsheet 7的過程中,蔡司特別對易用性和與傳統樣品制備技術的兼容性予以了關注。倒置配置是標準樣品載具可用于高分辨率顯微技術的重要先決條件。該配置帶來的挑戰主要是折射率不匹配,因為熒光從樣品中發射,經過水相細胞培養基、傾斜的玻璃蓋玻片和水介質,然后進入檢測物鏡。
優質的蔡司光學元件
檢測光路中特殊的蔡司光學元件可以補償折射率的不匹配,使您能夠像使用共聚焦顯微鏡一樣輕松、快速地對樣品進行成像。







蔡司Lattice Lightsheet 7應用案例

核纖層蛋白B1位于核膜上,在有絲分裂過程中參與核膜的分解和重組。在細胞周期不同階段的有絲分裂過程中,許多不同類型的細胞經常會形成“核內陷"。核內陷可以表現為從核膜延伸并穿過細胞核的管狀結構。這些獨特的結構雖然經常出現,但迄今為止,大多數研究都在固定細胞中進行。因此,盡管已經存在很多假說,這些結構的功能在很大程度上仍處于未知狀態。
該數據集由西雅圖Allen Institute for Cell Science的細胞系記錄:人工誘導多能干細胞,其內源性表達mEGFP標記的核纖層蛋白B1(AICS-0013)。過夜的實驗記錄了近8小時,每1.5分鐘成像一個體積。在整個持續時間都可以觀察到正在進行有絲分裂的細胞。在整個細胞周期中,可以清晰地觀察到大多數細胞中核內陷的形成和動態。
低光毒性的照明對于有絲分裂的成像至關重要,因為該過程十分精密且光敏。為了防止受損DNA的復制,一旦有任何來自激發光的損傷,細胞的有絲分裂就會停止。要在更長的時間內對有絲分裂事件進行成像,則需要低光毒性的Lattice Lightsheet 7以及非常穩定的系統。快速的體積成像與近各向同性的分辨率相結合,可以從各個角度觀察樣品,檢測獨特亞細胞結構的每一個細節。蔡司Lattice Lightsheet 7是進行此類挑戰實驗的好工具,它讓之前不可能實現的應用變為現實,且具有易用性,讓您可以輕松將其用于研究。
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